Construction de banques d'ADNc de semences de Pisum sativum et de Medicago truncatula

Amplification des ADNc liés aux adaptateurs E. Coli et phosphorylés


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Amplification RPC des ADNc ligués aux adaptateurs EcoRI et phosphorylés, avec le couple d'amorces dégénérées GDH : la taille attendue du produit d'amplification avec ce couple d'amorces est 420 pb.

Gel d'électrophorèse sur agarose (1 %) :

A            B            C            D             E
glutamate dehydrogenase vecteur clonage phage lambda gt11 extraction purification ARN totaux synthese premier second brin ADNc insert encapsidation recombinant transfection coli LE392 criblage titre banque sonde radioactive biochimej

Conclusion :

  • Les produits d'amplification de Medicago truncatula imbibé 10 heures (A) et imbibé 30 heures (B) semblent d'une taille inférieure à la taille attendue.
  • Il n'y a pas de produit d'amplification visible avec Pisum sativum imbibé 12 heures (D).
  • Le produit d'amplification de Pisum sativum imbibé 22 heures (E) a la taille attendue.
  • C : marqueurs de taille.

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