Construction de banques d'ADNc de semences de Pisum sativum et de Medicago truncatula

Amplification des milieux d'encapsidation des ADNc ligués aux bras du phage l gt11


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Amplification PCR des milieux d'empaquetage avec le couple d'amorces dégénérées GDH : la taille attendue du produit d'amplification avec ce couple d'amorces est 420 pb.

Gel d'électrophorèse sur agarose (1,5 %) : les produits d'amplification ne sont pas visibles ou d'une taille inférieure à celle attendue.

glutamate dehydrogenase vecteur clonage phage lambda gt11 extraction purification ARN totaux synthese premier second brin ADNc insert encapsidation recombinant transfection coli LE392 criblage titre banque sonde radioactive biochimej

De gauche à droite :

  • A, B, C & D : Pisum sativum imbibition 12 heures
  • E, F, G & H : Pisum sativum imbibition 22 heures
  • I, J, K, & L : Medicago truncatula imbibition 10 heures
  • M, N, O, & P : Medicago truncatula imbibition 30 heures
  • A, C, E, G, I, K, M & O : rapport [bras:ADNc] 1:1
  • B, D, F, H, J, L, N, & P : rapport [bras:ADNc] 3:1
  • A, B, E, F, I, J, M, & N : volume de milieux d'empaquetage amplifié = 1 µL
  • C, D, G, H, K, L, O, & P : volume de milieux d'empaquetage amplifié = 3 µL
  • Q : marqueurs de masse molaire

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