Fixation du 2,3-bis-phosphoglycérate sur l'hémoglobine
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1. Voir le principe de la dialyse à l'équilibre.

2. Calcul de la concentration en 32P-BPGlibre ET en 32P-BPGlié
  • A. S. (32P-BPG) = 1,5 Ci.mol-1
  • 1 Ci = 2,2 1012 dpm
===> A. S. (32P-BPG) = 1,5 x 2,2 1012 dpm.mol-1 <==> 1 mole de 32P-BPG = 3,3 1012 dpm

                                                                   valeurs radioactivité (dpm)
Donc :    quantité  32P-BPG (mol)   =   -------------------------------------------
                                                                         3,3 1012 (dpm.mol-1)

Le volume des compartiments est de 500 µL = 500 10-6 L : 

                                                                                   valeurs radioactivité (dpm)
===>   concentration  32P-BPG (mol.L-1)  =   --------------------------------------------------------
                                                                              3,3 1012 (dpm.mol-1)   x   500 10-6 (L)

Radioactivité compartiment A (dpm) [BPG] LIBRE (ÁM) Radioactivité compartiment B (dpm) [BPG] LIBRE
+ [BPG] LIE (ÁM)
4050 2.45 5870 3.56
6830 4.14 9650 5.85
14025 8.5 19025 11.5
29120 17.6 36860 22.3
61000 37 71800 43.5
158400 96 172050 104

[BPG] LIE (ÁM) nu = [BPG] LIE / [Hb]0 nu / [BPG] libre (ÁM-1)
1.1 0.11 0.045
1.7 0.17 0.041
3 0.3 0.036
4.7 0.47 0.027
6.5 0.65 0.018
8.3 0.83 0.0086

equilibre dialyse dialysis Hemoglobine haemoglobin allosterie allostery fixation bisphosphoglycerate oxygene hemoglobine oxyhemoglobine ligand Scatchard radioactivite biochimej 

Rôle physiologique du 2,3-BPG

Dans les érythrocytes, le 2,3-BPG est un effecteur allostérique de l'Hb (leur concentration est à peu près la même : 4,7 mM). Le 2,3-BPG se fixe donc en un site distinct de l'oxygène.

Une molécule de 2,3-BPG se fixe dans la cavité centrale (au milieu des 4 monomères de l'Hb, voir figure ci-dessous). Au pH physiologique, les charges négatives portées par le 2,3-BPG interagissent avec les chrages positives de la cavité centrale de la désoxyHb.

La fixation du 2,3-BPG stabilise donc la conformation désoxyHb (forme T selon le modèle MWC).

Le 2,3-BPG et l'oxygène ont donc des effets opposés sur l'équilibre :

L0

T0 <=====> R0

Le rôle physiologique du 2,3-BPG est très important : en faisant basculer la forme oxyHb (forme R, chargée en oxygène) en forme désoxyHb (forme T), il augmente la quantité d'oxygène transférée à la myoglobine dans les muscles et les tissus, malgré la faible pression partielle en oxygène qui y règne.

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Source : "Principes de Biochimie" - Horton et al. (1994)
Ed. DeBoeck Universités

 

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