Université d'Angers - Biochimie Métabolique
Cinétique de libération des PTH - acides aminés

 

Voir la dérivation des acides aminés.

La séquence en position C-terminale d'une protéine est obtenue par action de la carboxypeptidase Y.

On prélève une fraction aliquote du milieu réactionnel à différents temps d'action de l'enzyme. L'échantillon est traité par l'isothiocyanate de phényle (PITC). On sépare le phénylthiohydantoïne acide aminé (PTH - acide aminé) libéré par l'action de l'enzyme par chromatographie en phase reverse.

On trace la cinétique de libération des acides aminés (figure ci-dessous).

Décrire les techniques utilisées et déterminer la séquence C-terminale de cette protéine.

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Voir un développement : étude de l'hirudine.

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