Cinétique de libération des PTH - acides aminés en position C-terminale

La séquence en position C-terminale d'une protéine est obtenue par action de la carboxypeptidase Y :

  • on prélève une fraction aliquote du milieu réactionnel à différents temps d'action de l'enzyme
  • on sépare le phénylthiohydantoïne acide aminé (PTH - acide aminé) libéré par l'action de l'enzyme par chromatographie en )phase reverse
  • on trace la cinétique de libération des acides aminés (figure ci-contre)

 

Question 1 : Commentez les techniques utilisées ;

Question 2 : Déterminez la séquence C-terminale de cette protéine.