Enonce enzymologie Licence Janvier 2003 Autoevaluation Enonces et Corriges Examen Enseignement Biochimie Enzymologie Universite Angers Emmanuel Jaspard biochimej

Université d'Angers - Biochimie Métabolique - Janvier 2003

Un expérimentateur dispose d'une enzyme E et d'un substrat de cette enzyme, S. Par ailleurs, il dispose de deux molécules A et B.

Il veut déterminer si :

1^ère possibilité : l'une des molécules A ou B est un second substrat et l'autre un inhibiteur.
2^ème possibilité : A et B sont deux inhibiteurs.

Il mesure la vitesse initiale de la réaction dans différentes conditions. Parmi les résultats obtenus, en voici certains.

A. Vitesse initiale de la réaction (en µM.min^-1) pour différentes concentrations de S et de A :

[S]₀ (mM)	[A]₀ (nM)
[S]₀ (mM)	6	10	21
0,66	3,40	5,00	8,33
1,40	4,76	6,90	10,20
10,20	6,80	9,09	12,82

B. Vitesse initiale de la réaction (en UA.min^-1) pour différentes concentrations de S et de B (en présence de A à une concentration maintenue fixe) :

[S]₀ (mM)	[B]₀ (µM)
[S]₀ (mM)	0	0,5	3
0,20	0,137	0,092	0,069
0,30	0,189	0,128	0,097
0,59	0,316	0,216	0,164
2,15	0,641	0,420	0,312

1. Si vous pensez que A ou B est un second substrat, ne faites que les représentations primaires. Déterminez les paramètres cinétiques auxquels vous avez accès. Donnez l'ordre de fixation des substrats.

2. Déterminez les paramètres cinétiques en absence d'inhibiteur (Vmax, KM et kcat). Déterminez les paramètres cinétiques en présence du ou des inhibiteur(s). Précisez le ou les type(s) d'inhibition et calculez la ou les constante(s) d'inhibition KI.

3. Proposez un schéma du mécanisme réactionnel tenant compte des molécules E, S, A et B et des différentes constantes déterminées.

Données : l = 1 cm ; ε_M^produit = 1230 M^-1.cm^-1 ; [E]₀ = 9 µM