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Le tableau suivant donne les valeurs
de vitesses initiales (en UA.h-1) d'une réaction catalysée
par une enzyme E.
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[A]0 (mM)
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[B]0 (µM)
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0,3
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0,5
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0,8
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1,05
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0,027
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2,00
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3,03
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4,29
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5,41
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0,039
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2,56
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3,85
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5,29
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6,45
|
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0,066
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3,55
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5,08
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6,71
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8,00
|
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0,14
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5,00
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6,90
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8,55
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9,71
|
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1,02
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7,30
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9,10
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10,75
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12,05
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Partie A : tracés graphiques
et détermination des paramètres cinétiques
1ère possibilité
: vous pensez que A ou B est un inhibiteur.
- Déterminez les paramètres cinétiques
en absence de l'inhibiteur (VMax,
KM et kcat). Exprimez kcat en sec-1.
- Déterminez les paramètres cinétiques
en présence de l'inhibiteur.
- Précisez le type d'inhibition et calculez
la constante d'inhibition KI.
2ème possibilité
: vous pensez que A et B sont deux substrats.
- Tracez les représentations primaires
ET la ou les représentation(s) secondaire(s).
- Déterminez tous les paramètres
cinétiques auxquels vous avez accès. Exprimez kcat
en sec-1.
Partie B : schéma du mécanisme
réactionnel
Une molécule C est un inhibiteur compétitif
de A et une molécule I est un inhibiteur incompétitif
de A.
- Quelle que soit la possibilité que vous
avez retenue, écrivez le schéma du mécanisme réactionnel
complet en tenant compte des molécules E, A, B, C et I et des
différentes constantes déterminées.
- Quel est le type d'inhibition de C par rapport
à B et de I par rapport à B ?
Données : [E]0 =
7 nM ; εMproduit = 16270 M-1.cm-1 ; l =
1 cm |
