La séquence en position C-terminale d'une protéine est obtenue par action de la carboxypeptidase Y.
On prélève une fraction aliquote du milieu réactionnel à différents temps d'action de l'enzyme. L'échantillon est traité par l'isothiocyanate de phényle (PITC). On sépare le phénylthiohydantoïne acide aminé (PTH - acide aminé) libéré par l'action de l'enzyme par chromatographie en phase reverse.
On trace la cinétique de libération des acides aminés (figure ci-dessous).
Décrire les techniques utilisées et déterminer la séquence C-terminale de cette protéine.
