Étude de l'albumine de sérum bovin (BSA) |
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Une analyse quantitative des acides aminés révèle que l'albumine de sérum bovin (ou "Bovine Serum Albumin" - BSA) contient en masse 0,58% de tryptophane. Sachant que la masse moléculaire du Trp = 204 Da : a. Calculer la masse moléculaire minimale de la BSA.b. Une masse moléculaire d'environ 70 000 Da est déterminée par la technique de filtration sur gel. Combien de Trp la BSA contient-elle ? c. La BSA est biosynthétisée sous forme d'une protéine de 607 acides aminés qui contient 3 Trp. Qu’en conclure ? |
a. La donnée 0,58 % Trp signifie : 0,58 g Trp <=> 100 g de BSA Par ailleurs, si la BSA contient au minimum 1 Trp, alors : 204 g Trp <=> 1 mole de BSA Donc : 1 mole de BSA = (204 x 100) / 0,58 = 35172 g au minimum b. La masse moléculaire 70.000 Da indique que la BSA contient 2 Trp. c. La BSA est biosynthétisée sous forme d'un précurseur de 607 acides aminés avec une masse de 69293 Da. Le précurseur contient 3 Trp.
La forme mature de la BSA (acides aminés 25 à 607 - masse molaire 66.463 Da) ne contient donc que 2 Trp. Elle a un point isoélectrique = 4,7. |
Visualisation de la BSA de Bos taurus à une résolution de 2,7 Å (2012) PDB : 3V03 La BSA est un homodimère :
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Caractéristiques de la BSA La fonction physiologique principale de la BSA est la régulation de la pression osmotique colloÏdale du sang. En effet, la BSA (Bos taurus - P02769) possède de nombreux sites de fixations de ligands :
Source : Majorek et al. (2012) On comptabilise plus de 90 structures tridimensionelles de l'albumine du sérum dans la PDB : homme : human serum albumin (HSA) - PDB : 3UIV ; vache : bovine serum albumin (BSA) - PDB : 3V03 ; cheval : equine serum albumin (ESA) - PDB : 3V08 ; lapin : rabbit serum albumin (RSA) - PDB : 3V09. La BSA est très utilisée en laboratoire : en effet, c'est l'archétype des protéines dites "globulaires" dont la structure tridimensionnelle est assimilée à une sphère, ce qui permet de faire l'hypothèse d'une proportionalité entre leur masse molaire et leur dimension, donc leur volume (plus précisément leur rayon de Stokes).
On utilise aussi la BSA parce qu'elle a un côut très faible et elle est très stable car elle contient 17 ponts disulfure. |
Rappel sur le
Dalton
et le nombre d'Avogadro
1. Le Dalton (Da) = unité de masse atomique (U.M.A.) : c'est l'unité de masse trés proche de celle de l'atome d'hydrogène (1,0000). En hommage au grand chimiste et physicien anglais John Dalton (1766 - 1844) qui a développé la théorie atomique de la matière. 2. Postulat d'Avogadro (gaz): le volume d'une molécule-gramme ou mole de gaz (correspondant au poids moléculaire exprimé en grammes) est le volume moléculaire = 22,414 litres (à 0°C et 1 atm). Le nombre de molécules dans une mole est : N = 6,02 1023 (nombre d'Avogadro).
En conséquence : 1 U.M.A. est le douzième (car 12 nucléons) de la masse d'un atome de carbone => 1 Da = 1 U.M.A. = 12,000 / (12 x N) = 1 / N = 1,66 10-24 g |