1. Réactions d'oxydo-réduction et potentiel de réduction standard

a. Définitions : réducteur - oxydant - réaction et couple redox
b. Le potentiel de réduction standard

2. Potentiel de réduction de 2 demi-réactions redox : Relation de Nernst

3. Relation entre le potentiel de réduction standard et l'énergie libre de Gibbs standard

4. Structure du NAD⁺ et du NADP⁺. Mécanisme de transfert de l'ion hydrure

5. Rôles biologiques des formes réduites NADH et du NADPH

6. Respiration cellulaire : la chaîne respiratoire

a. Généralités sur la respiration cellulaire aérobie
b. La mitochondrie et la chaîne respiratoire
c. Les protéines de la chaîne respiratoire
d. Mécanisme du transfert des électrons
e. Les navettes
f. Bilan - résumé de la chaîne de transport d'électrons

7. Respiration cellulaire : la synthèse d'ATP par phosphorylation oxydative et l'ATP synthase

a. Force proton-motrice et théorie chimio-osmotique
b. Le complexe V ou l'ATP synthase
c. Formalisme de la force proton-motrice
d. Le mécanisme de la synthèse de l'ATP par l'ATP synthase

8. Cours sur la respiration chez les végétaux

9. Liens Internet et références bibliographiques

1. Réactions d'oxydo-réduction et potentiel de réduction standard.

a. Définitions : réducteur - oxydant - réaction et couple redox. 

De nombreuses réactions du métabolisme mettent en jeu des transferts d'électrons et bien souvent de protons. Une même molécule va donc être dans un état réduit ou oxydé et ces deux formes de la même molécule s'appelle un couple oxydo-réducteur ou couple rédox.

Considérons une molécule A. Par convention, les deux formes oxydée et réduite de A s'écrivent : (A_ox / A_red)

La réaction d'oxydo-réduction ou réaction redox entre ces deux formes s'écrit : α_A A_ox + n e^- <=> β_A A_red

• A_ox = forme oxydée de A
• A_red = forme réduite de A
• n = nombre d'électrons captés par A_ox
• la molécule qui perd des électrons est oxydée et s'appelle le réducteur
• la molécule qui accepte des électrons est réduite et s'appelle l'oxydant
• un couple redox est caractérisé par un potentiel de réduction standard

On mesure un potentiel de réduction standard à l'aide d'une pile électrochimique constituée de 2 demi-piles. Chaque demi pile est un couple redox, siège d'une réaction rédox.

Quand on mesure le potentiel rédox standard d'un couple rédox, l'une de ces demi-piles sert de référence pour la mesure (de la même manière que la mesure de l'énergie libre de Gibbs nécessite que l'on ait fixé des conditions de référence).

Cette demi-pile de référence est l'électrode à hydrogène (qui est le siège de l'oxydation de l'hydrogène) :

• la demi-pile de référence contient de l'hydrogène gazeux (H₂) à une pression de 1 atmosphère
• une solution de H⁺ à une concentration de 1 M donc à un pH = 0
• le potentiel de réduction du couple redox (2H⁺/H₂) est le potentiel de réduction standard : E°. Il est fixé arbitrairement à 0 V

Cependant, pour les réactions biologiques, les conditions standard se rapportent à une concentration d'ions H⁺ de 10^-7 M (pH = 7) dans la demi pile de référence.

Ainsi, pour les réactions biologiques, on définit un potentiel de réduction standard dans les conditions physiologiques : E°'.

Voir le calcul de la valeur de E°'(2H⁺/H₂).

2. Potentiel de réduction de 2 demi-réactions redox : Relation de Walther Hermann Nernst

Lorsque les électrodes d'une pile sont réunies par un conducteur extérieur au système, un courant électrique traverse spontanément la pile et parcourt l'ensemble du circuit.

a. La réaction d'oxydation qui se produit à l'anode où se trouve le couple oxydo-réducteur (B_ox / B_red) s'écrit :

α_B B_red <=> β_B B_ox + n e^-

• B_red = forme réduite de B
• B_ox = forme oxydée de B
• n = nombre d'électrons cédés par B_red 
• le potentiel rédox standard de ce couple est E°'_B 

b. La réaction de réduction qui se produit à la cathode où se trouve le couple oxydo-réducteur (A_ox / A_red) s'écrit :

α_A A_ox + n e^- <=> β_A A_red

• A_ox = forme oxydée de A
• A_red = forme réduite de A
• n = nombre d'électrons captés par A_ox 
• le potentiel rédox standard de ce couple est E°'_A

c. La réaction électrochimique totale dans la pile est la somme des 2 demi-réactions rédox et s'écrit :

α_A A_ox + α_B B_red <=> β_A A_red + β_B B_ox avec : E°'_A > E°'_B

Voir la règle pour orienter les 2 demi-réactions rédox lors du couplage.

Le potentiel de réduction de cette réaction globale, ΔE'_réaction, est donné par la relation de Nernst :

• R = constante des gaz parfaits = 8,314 J.mol^-1.K^-1 = 1,987 cal.mol^-1.K^-1
• T = température absolue = 273,3 °K + T°C
• n = nombre d'électrons échangés (le plus souvent 2 en biochimie)
• F = constante de Faraday = 96493,5 Coulombs.équivalent^-1 = 23062 cal.V^-1.équivalent^-1 = 6,02 10²³ charges électroniques
• les termes : ^β_B, ... sont les coefficients stoechiométriques élevés en puissance
• attention : c'est le signe "moins" entre les deux termes

Voir une démonstration de l'équation de Nernst.

Exercices de calculs de potentiels rédox (et autres : thermodynamique, cinétique ...).

3. Relation entre la différence de potentiel de réduction standard et la variation d'énergie libre de Gibbs standard

La différence de potentiel de réduction standard, ΔE°', pour le transfert d'électrons d'une molécule à une autre, est liée à la variation d'énergie libre standard par la relation :

ΔG°'_réaction = -  n . F . ΔE°'_réaction

Voir une application.

4. Structure du NAD⁺ et du NADP⁺. Mécanisme de transfert de l'ion hydrure

Dans un trés grand nombre de réactions d'oxydo-réduction qui ont lieu dans la cellule, les électrons sont transférés par des coenzymes : on peut citer à titre d'exemple, la nicotinamide adénine dinucléotide ou NAD⁺ et la nicotinamide adénine dinucléotide phosphate ou NADP⁺.

• ces deux coenzymes contiennent la nicotinamide qui est l'amide de l'acide nicotinique
• ils contiennent une liaison phosphoanhydride qui relie deux nucléotides: l'adénosine monophosphate, qui provient de l'ATP, et le ribonucléotide de nicotinamide appelé nicotinamide mononucléotide
• dans la structure du NADP⁺ et du NADPH, un groupe phosphoryle supplémentaire substitue l'hydrogène de l'hydroxyle situé en position 2' du ribose lié à l'adénine

Enfin, les spectres d'absorption des formes oxydée et réduite sont distincts et cette propriété est utilisée dans les dosages enzymatiques qui mettent en jeu des déshydrogénases.

5. Rôles biologiques des formes réduites NADH et du NADPH

Malgré des structures très semblables, les formes réduites de ces deux coenzymes sont employées dans la cellule de manière très différente.

• Le NADH qui est produit par les réactions d'oxydation catabolique est retransformé en NAD⁺ dans des conditions aérobies avec production concomitante d'ATP : c'est la phosphorylation oxydative. Le NADH est donc lié aux réactions du catabolisme (réactions de dégradation). Il représente une source énergétique préalable à l'ATP.

• Le NADPH est lié aux réactions anaboliques (réactions de biosynthèse) et constitue un pouvoir réducteur. Le NADPH est issu de réactions d'oxydation de voies particulières, comme la voie des pentoses phosphate.

• Le NADPH a pour rôle de fournir des ions hydrures aux processus bio-synthétiques réducteurs tels que : la synthèse d'acides gras, la synthèse d'acides aminés et celle des nucléotides. 

6. Respiration cellulaire : la chaîne respiratoire

a. Généralités sur la respiration cellulaire aérobie

De manière schématique, les réactions du catabolisme ont deux finalités :

• Fournir des molécules, notamment des squelettes carbonés, aux voies de biosynthèse.
• Fournir des coenzymes réduits : NADH et FADH₂ qui sont à l'origine de la synthèse d'ATP via la chaîne respiratoire et l'ATP syntase.

La respiration cellulaire correspond donc aux processus suivants :

• Dans une cellule Eucaryote, la glycolyse a lieu dans le cytoplasme. Le pouvoir réducteur porté par le NADH formé lors de la glycolyse est transféré dans la mitochondrie par des systèmes protéiques de transport ou navette.

• Le cycle de Krebs produit du NADH et du FADH₂. Comme le cycle de Krebs a lieu dans la mitochondrie, le pouvoir réducteur porté pas ces deux molécules se trouve immédiatement en place pour être pris en charge par la chaîne respiratoire qui se situe dans la mitochondrie.

• La chaîne respiratoire convertit le pouvoir réducteur des coenzymes réduits en une forme d'énergie qui alimente la phosphorylation oxydative qui produit la plus grande partie de l'ATP de la cellule via l'ATP synthase.

Source : "Biologie"Campbell (1995) Ed. De Boeck Université

Chez les plantes un processus analogue a lieu dans les chloroplastes. Un processus très semblable se déroule chez les bactéries.

La mitochondrie est limitée par deux membranes caractérisées par des propriétés très différentes :

• La membrane externe est pauvre en protéines. Elle contient, en particulier, des protéines transmembranaires, les porines, qui permettent le passage des ions et des métabolites hydrosolubles de masse molaire < 7.000 Daltons.
• A l'inverse, la membrane interne est très riche en protéines mais elle est quasiment imperméable aux ions et aux métabolites hydrosolubles. Ces substances ne peuvent traverser la membrane qu'à l'aide de protéines membranaires de transport (l'ATP, l'ADP et le Pi sont transportés par ce type de protéines), ou de systèmes plus complexes qu'on appelle navette.
• L'espace entre ces deux membranes s'appelle l'espace intermembranaire.
• La zone interne de la mitochondrie (bordée par la membrane interne) s'appelle la matrice. Elle contient les enzymes du cycle de Krebs et la plupart de celles qui catalysent l'oxydation des acides gras.
• La chaîne respiratoire est localisée dans la membrane interne des mitochondries. Le nombre des crêtes accroit la surface de cette membrane et ainsi chaque mitochondrie contient des milliers d'exemplaires de la chaîne de transport d'électrons. Les crêtes pénètrent dans la matrice.
• Certaines protéines mitochondriales sont synthétisées par la mitochondrie (génome mitochondrial), mais la plupart d'entre elles sont codées par le génome nucléaire et importées dans la mitochondrie.

c. Les protéines de la chaîne respiratoire

La chaîne respiratoire est un ensemble de complexes protéiques qui assurent un transfert de protons et/ou d'électrons comme le ferait "une équipe de rugby qui se passe le ballon".

Les caractéristiques des quatre complexes protéiques sont les suivants :

d. Mécanismes du transfert des électrons

Complexe I

Le (NADH + H⁺) cède ses électrons par paire (sous forme d'ion hydrure, H^-) alors que le coenzyme Q (ou ubiquinone) les accepte un par un. Le complexe I catalyse la réduction de la FMN ou flavine mononucléotide par le (NADH + H⁺) selon les étapes suivantes :

          +H⁺, + H^-                   -H⁺ , - e^-                  -H⁺ , - e^-
FMN -----------> FMNH₂ ----------> FMNH^. -----------> FMN

La FMN est donc une sorte de "convertisseur" d'un flux bi-électronique en un flux mono-électronique. Elle cède ses électrons à un ensemble de centres Fe - S, accepteurs mono-électroniques, qui eux-même les cèdent au coenzyme Q qui est réduit en passant par un intermédiaire semi-quinone :

     +e^-              +2H⁺ , + e^-
Q -----> Q.-  ------------> QH₂

• Le coenzyme Q est un transporteur mobile de la chaîne respiratoire
• lors du déplacement des électrons au sein du complexe I, celui-ci expulse 3 ou 4 protons de la matrice vers l'espace intermembranaire, ce qui créé un gradient de concentration de protons.

Complexe II

• Le complexe II accepte deux électrons du succinate et catalyse la réduction du coenzyme Q en QH₂, le succinate étant transformé en fumarate (c'est l'une des réactions du cycle de Krebs)
• la réaction met en jeu le FAD, des centres Fe - S et un cytochrome b₅₆₀ attaché au complexe II
• la variation d'énergie libre de la réaction est faible du fait d'une faible différence de potentiel de réduction entre les donneurs et les accepteurs d'électrons.
• en conséquence, le complexe II ne contribue pas à l'expulsion de protons.

• Du FADH₂ issu du cycle de Krebs
• portés par le NADH formé lors de la glycolyse puis transférés sous forme de FADH₂ dans la mitochondrie par des systèmes de navette.

Complexe III

• Il est constitué entre autre d'une protéine Fe - S, d'un cytochrome b qui porte les groupes hème b₅₆₀ et b₅₆₆ et du cytochrome c₁
• les électrons sont cédés par le complexe III au cytochrome c (attention : différent du cytochrome c₁) qui les amène au complexe IV
• le tracé des électrons n'a été résolu que quand un trajet circulaire, appelé cycle Q, fût suggéré par Peter Mitchell puis détaillé entre autres par Bernard Trumpower
• le coenzyme Q et le coenzyme QH₂ diffusent d'une face à l'autre de la membrane mitochondriale interne et l'ensemble des deux hèmes du cytochrome b occupe toute l'épaisseur de cette membrane
• la variation d'énergie libre liée au parcours des électrons au sein du complexe III est légrement plus faible que celle générée par le complexe I
• cependant, 2 x 2 protons sont expulsés vers l'espace intermembranaire, le complexe III contribue à la formation du gradient de concentration de protons.

Complexe IV

• Le complexe IV est le dernier de la chaîne de transport d'électrons : il catalyse la réduction de l'oxygène moléculaire (O₂) en eau (H₂O)
• quand les électrons traversent les cytochromes a et a₃, les atomes de fer et de cuivre des hèmes changent d'état d'oxydation
• le complexe IV contribue à la formation du gradient de concentration de protons en expulsant 2 protons vers l'espace intermembranaire et, du fait de la formation de molécule d'eau, en soustrayant des protons de la matrice.

e. Les navettes

Au cours de la glycolyse, 2 molécules de NAD réduit (NADH + H⁺) sont formées par molécule de glucose dégradé.

En aérobiose, la réoxydation des coenzymes réduits se fait dans la mitochondrie via la chaîne respiratoire. Or la membrane mitochondriale est imperméable aux coenzymes pyridiniques.

L'entrée du pouvoir réducteur (2 H⁺ + 2 e^-) dans la mitochondrie se fait par l’intermédiaire de systmes de transport appelés navette.

La navette glycérol phosphate : elle met en jeu 2 enzymes : une glycérol 3-phosphate déshydrogénase (G3PDH) cytosolique et un complexe G3PDH membranaire qui contient un groupe prosthétique FAD. Le pouvoir réducteur entre dans la mitochondrie de la manière suivante :

• Celui-ci est d'abord transféré à la dihydroxyacétone phosphate (DHAP, intermédiaire de la glycolyse) pour former du glycérol 3-phosphate
• ce dernier est reconverti en DHAP par le complexe G3PDH membranaire qui transfère le pouvoir réducteur au FAD pour former FADH₂
• enfin le pouvoir réducteur est transféré à un élément mobile (Q) qui le transfère à la chaîne de transport d'électrons au niveau du complexe III.

La navette malate - aspartate : elle met en jeu 2 enzymes : la malate déshydrogénase et l'aspartate transaminase. Ces deux enzymes sont présentes à la fois dans le cytosol et dans la mitochondrie. Le mécanisme extrêmement sophistiqué qui permet au pouvoir réducteur d'entrer dans la chaîne de transport d'électrons est le suivant :

• Celui-ci est d'abord transféré au malate qui entre dans la mitochondrie via une enzyme membranaire que l'on appelle une translocase
• le malate est converti en aspartate quand le pouvoir réducteur est transféré à du NAD⁺ mitochondrial qui est pris en charge par la chaîne de transport d'électrons
• l'aspartate retourne vers le cytosol via une autre translocase pour qu'un autre cycle ait lieu.

Remarque : chez les organismes anaérobies (ou au cours de la fermentation), il n'y a pas de chaîne respiratoire (ou elle n'est pas employée). La réoxydation du NADH formé au cours de la glycolyse se fait via la conversion du pyruvate en lactate ou en éthanol.

f. Bilan - résumé de la chaîne de transport d'électrons

L'enchaînement des réactions d'oxydo-réduction qui ont lieu lors du transfert des électrons de la chaîne respiratoire est résumé dans la figure ci-dessous.

L'énergie libre de Gibbs étant une grandeur d'état thermodynamique, on peut ne considèrer que les réactions impliquant le premier donneur de protons et d'électrons (NADH) et le dernier accepteur d'électrons (l'oxygène moléculaire, O₂).

Les deux demi-réaction rédox qui, du point de vue énergétique, résument la chaîne respiratoire sont :

D'après la relation qui lie la différence de potentiel de réduction standard, ΔE°'_réaction, à la variation d'énergie libre de Gibbs standard, ΔG°'_réaction :

ΔG°'_réaction = - n . F . ΔE°'_réaction = - (2 . 96500 . 1,14) ≈ - 220 kJ.mol^-1

Puisque la variation d'énergie libre standard de la synthèse de l'ATP est environ +30,5 kJ.mol^-1 , la variation d'énergie libre standard liée à la réoxydation du NADH devrait permettre, en théorie, la synthèse de [220 kJ.mol^-1 / 30,5 kJ.mol^-1] = 7 molécules d'ATP par molécule de NADH réoxydé.

Or ce sont 3 molécules d'ATP qui sont synthétisées.

• En effet, le réel potentiel énergétique pour la synthèse d'ATP émane de la force proton motrice.
• Par ailleurs, c'est le retour des protons vers la matrice qui est le moteur de la machinerie de synthèse de l'ATP.
• Or il faut 3 protons pour synthétiser 1 molécule d'ATP et 9 à 10 protons ont été expulsés par paire d'électrons issus du (NADH + H⁺).

7. Respiration cellulaire : la synthèse d'ATP par phosphorylation oxydative et l'ATP synthase

a. Force proton-motrice et théorie chimio-osmotique

La théorie chimio-osmotique formulée par Peter Mitchell en 1961 (Prix Nobel en 1978) postule que le gradient de concentration de protons crée à travers la membrane sert de réservoir d'énergie libre de Gibbs pour la synthèse d'ATP.

En d'autres termes, au fur et à mesure que les électrons traversent les quatre complexes de la chaîne de transport d'électrons, des protons passent de la matrice à l'espace intermembranaire et générent un gradient de concentration de protons qui constitue ce réservoir d'énergie libre.

En effet, quand ces protons repassent la membrane interne en traversant une protéine membranaire intrinsèque, l'ATP synthase, cette énergie libre est libérée et utilisée par l'ATP synthase pour synthétiser l'ATP.

En conséquence, la matrice devient :

• plus alcaline : différence de pH puisque pH = - log ([H⁺])
• plus négative : diminution de charges + puisque diminution du nombre de protons

que l'espace intermembranaire.

Voir l'article : Mitchell P. (1961) "Coupling of phosphorylation to electron and hydrogen transfer by a chemi-osmotic type of mechanism" Nature 191, 144 - 148.

b. Le complexe V ou ATP synthase

Le complexe V, appelé ATP synthase F₀F₁ (nom officiel : H⁺-transporting two-sector ATPase, E.C. 7.1.2.2), utilise le gradient de concentration de protons comme source d'énergie pour synthétiser l'ATP :

• le sigle "F" désigne un facteur de couplage, selon la nomenclature des enzymes : en effet, l'ATP synthase couple la phosphorylation de l'ADP en ATP à l'oxydation de substrats par la mitochondrie.
• les ATP synthases sont des protéines oligomériques de masse molaire supérieure à 450 kDa et de structure très complexe : les types différents de chaînes polypeptidiques qui les composent sont au nombre de 8 chez E. coli, 8 ou 9 dans le chloroplaste, 10 ou plus dans la mitochondrie et au moins 13 pour celle du coeur de boeuf.

• F₁ est l'élément qui catalyse l'hydrolyse de l'ATP : on l'appelle usuellement l'ATPase F₁ ou ATP hydrolase
• le composant F₁ de l'ATP synthase de E. coli a une stoechiométrie α₃β₃γδε (chaque lettre indiquant un type différent de sous-unité)
• le composant F₁ de l'ATP synthase de E. coli déborde dans le cytosol et celui de la mitochondrie déborde dans la matrice

• F₀ constitue un tunnel à protons sur toute l'épaisseur de la membrane interne de la mitochondrie
• il a été baptisé ainsi du fait de sa sensibilité à l'oligomycine, antibiotique qui en se fixant à F₀ empêche la synthèse d'ATP
• le composant F₀ de l'ATP synthase de E. coli a une stoechiométrie a₁b₂c_10-12
• la structure et la composition oligomérique du composant F₀ de la mitochondrie est plus complexe que celui de E. coli

Attention : il ne faut pas confondre l'ATP synthase F₀F₁ et les ATPases de type "F" (ou F₀F₁-ATPase). Ces dernières sont des pompes ioniques ou ATPases ionophores : elle hydrolysent l'ATP. L'énergie qu'elles libèrent en hydrolysant l'ATP est utilisée pour le transport d'ions.

Il existe plusieurs autres types de pompes ioniques ATPases qui hydrolysent l'ATP.

• ATPases de type "P" : ce sont des transporteurs de cations avec formation d'un intermédiaire phosphorylé à haut potentiel énergétique. Ce sont soit des monomères d'environ 100 kDa ou des oligomères. Elles transportent le calcium, les protons ou échangent le sodium et le potassium à travers la membrane plasmique des eucaryotes.
• ATPases de type "V" : ce sont pompes à protons que l'on trouve dans les vacuoles, les lysosomes, l'appareil de Golgi .... Il n'y a pas de phosphorylation intermédiaire de l'enzyme. Elles sont constituées de deux types de chaînes polypeptidiques (A : 78 - 89 kDa et B : 60 - 65 kda) selon une organisation qui ressemble à celle des ATPases de type "F".

D'autres types d'ATPases :

• de type "M" : transporteur de drogues
• de type "H" : activité ATPase des protéines de choc thermique
• de type "C" : impliquées dans les phénomènes de contraction (myosine)

c. Formalisme de la force proton-motrice

La composante chimique dépend de la différence de pH, ΔpH, entre les deux compartiments :

ΔG'_chimique = 2,303 . n . RT . (pH_int - pH_ext) = 2,303 . n . RT . ΔpH

ΔG'_électrique = n . F . ΔΨm

Par convention, le signe de ΔΨm est positif quand un ion est transporté du compartiment négatif (la matrice) vers le compartiment positif (l'espace intermembranaire). La variation d'énergie libre globale est donc :

ΔG'_globale = (n . F . ΔΨm) + (2,303 . n . RT . ΔpH)

A 37°C, la valeur de chaque terme est :

• dans les conditions physiologiques : Δp = ± 0,20 à 0,25 V. La valeur positive indique le passage de protons de l'espace intermembranaire vers la matrice

• ΔpH = (pH_{espace intermembranaire}   -  pH_matrice) = - 1,4 unités pH

• ΔΨm = (Ψ_{espace intermembranaire}  -  Ψ_matrice) = 0,14 V 

• ΔG'_globale = + 21,8 kJ.mol^-1 par proton expulsé

• remarque : certaines sources indiquent les valeurs : ΔpH = - 1 unité pH et ΔΨm = 0,15 V ou 0,16 V

La théorie chimiosmotique implique que la membrane interne est imperméable aux protons, sinon le gradient se dissiperait au fur et à mesure.

Voir un cours sur les transports membranaires.

d. Le mécanisme de la synthèse de l'ATP par l'ATP synthase

La réaction peut s'écrire de manière générale

n H⁺_matrice + ADP + P_i -> n H⁺_{espace intermembranaire} + ATP + H₂O

• Paul Boyer (Prix Nobel en 1997) a proposé un modèle pour le mécanisme enzymatique de la synthèse de l'ATP.
• Ce modèle a été confirmé par l'élucidation de la structure tridimensionnelle de l'ATP synthase par John Walker (Prix Nobel en 1997).

Le composant F₁ de l'ATP synthase de E. coli a une stoechiométrie α₃β₃γδε (chaque lettre indiquant un type différent de sous-unité).

• l'ATP synthase est schématiquement un cylindre composé de sous-unités α et β altérnées et d'une sous-unité γ située au centre de ce cylindre
• elle contient 3 sites catalytiques portés par les sous-unités β à l'interface avec les sous-unitésα
• elle contient 3 sites non catalytiques qui prédominent dans les sous-unités α et débordent sur les sous-unités β
• quand la sous-unité γ tourne, elle induit des changements de conformation des sous-unités β

source : http://nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates/1997/

Les états conformationnels adoptés par les sous-unités β sont appelés : β_O pour "ouvert" ("open"), β_L pour "relâché"("loose") et β_T pour "à haute affinité" ("tight").

Le mécanisme est le suivant :

Source : Université de Leeds

• une molécule d'ATP déjà synthétisée est fixée à β_T
• β_L fixe une molécule d'ADP et de P_i
• le couplage entre la sous-unité γ et la sous-unité c de F₀ permet à l'énergie apportée par la dissipation du gradient de concentration de protons de faire tourner la sous-unités γ
• la sous-unité γ ayant tourné, β_T change de conformation en β_O et l'ATP déjà synthétisé est relargué
• dans le même temps, β_L change de conformation en β_T et β_O change de conformation en β_L
• le P_i réagit avec l'ADP pour former l'ATP au niveau de la sous-unité passée dans la conformation β_T
• le système est de nouveau dans la configuration générale de départ

Voir des compléments concernant le mécanisme de l'ATP synthase.

Considérons la molécule d'ATP qui est synthétisée au niveau de la sous-unité dans la conformation β_T:

• Cette molécule d'ATP se trouve dans un puits thermodynamique ce qui signifie que son énergie de fixation est tellement importante qu'elle ne peut-être relarguée tant que la sous-unité est dans la conformation β_T
• la rotation de la sous-unité γ change la conformation des sous-unités β
• ainsi le site à haute affinité pour l'ATP (K_s < 1 µM) devient un site à faible affinité (sous-unité dans la conformation β_O) et l'ATP est relargué.